Identificação do potencial do compostos fenólicos frente a isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae multidroga resistente e potenciais formadores de biofilme

Abstract

Nos últimos anos, o índice de infecções causadas por cepas resistentes de K. pneumoniae produtoras de β-lactamases do tipo ESBls, carbapenemases do tipo KPC, e produtoras de biofilme, tem sido bastante reportado em todo mundo. Com isso, tem-se aumentado o período de internação e a escassez de opção de tratamentos efetivos contra esses microrgonismos. Assim, o uso de compostos naturais tem sido ultimamente a forma alternativa de tratamento. Neste estudo, investigamos o potencial antimicrobiano e antibiofilme de compostos fenólicos contra isolados clínicos de K. pneumoniae MDR. No qual foram analisados o perfil epidemiológico, a formação de biofilme em diferentes meios e a presença de genes de virulência (fimH, mrkD, cps) relacionados ao biofilme. Para isso, foram utilizados 34 isolados de dois hospitais públicos (H1 e H2) em Recife-PE, Brasil e um isolado sensível da coleção da UFPEDA. A identidade taxonômica de todos os isolados foi confirmada pela técnica MALDI- TOF MS e perfil de resistência através do equipamento de automação VITEK 2 Compact (BioMérieux®. Para investigar o potencial de formação de biofilme, foi utilizado o método Cristal Violet (CV) comparando dois meios de cultura: Infusão Cerebral e Cardíaca (BHI) e Luria-Bertanti (LB) fornecidas com glicose ou não.Além disso, foi verificada a presença e frequência de três genes de virulência (fimH, mrkD, cps) através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). , investigou-se o potencial antimicrobiano e antibiofilme de cinco compostos fenólicos (ácido gálico, ácido 4-hidroxibenzóico, ácido cafeico, ácido trans-ferúlico e quercetina. Os isolados foram confirmados como resistentes a múltiplas drogas e capazes de formar biofilme forte nos meios e nas condições testadas. A maioria dos isolados (29,4%) eram da UTI (Unidade de Terapia Intensiva), Neurocirurgia e Unidade Coronariana (UCO), 20,6% para ambos. swab retal (41,2%), seguido de urina (26,5%) e sangue (5,9%). Quanto ao perfil de resistência, foram observadas porcentagens distintas para os diferentes antimicrobianos testados, com ênfase nas cefalosporinas e carbapenêmicos, onde 100% dos isolados de H1 eram resistentes e 78,5% e 68%, respectivamente, resistentes em H2. Em relação aos genes de virulência, os mais prevalentes foram fimH (73%), seguidos por cps (67%) e mrkD (34,7%). Entre os hospitais, cps (41,2%) foi mais frequente nos isolados H1 e fimH (41,2%) nos isolados H2. Em relação aos cinco compostos testados, o ácido cafeico e trans-ferúlico foram mais eficazes contra isolados de K. pneumoniae MDR, apresentando inibição de crescimento e biofilme em torno de 75%. Este é o primeiro relato de formação de antibiofilme e antimicrobiano na MDR de K. pneumoniae promovido pelo ácido trans-ferúlico, o que sugere que esses compostos podem ser a alternativa de escolha no tratamento de infecções associadas ao biofilme causadas por isolados de K. pneumoniae MDR.